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GB/T 27417-2017化(huà)學分(fēn)析方法确認和(hé)驗證指南(nán)4月(yuè)1日實施
随著(zhe)科學技術的(de)進步和(hé)國際貿易的(de)發展，國内外對(duì)實驗室化(huà)學分(fēn)析方法和(hé)檢測數據的(de)質量提出了(le)更高(gāo)要求。目前，國外已經發布了(le)一些關于化(huà)學分(fēn)析方法的(de)确認規範，但我國尚未發布關于化(huà)學分(fēn)析實驗室方法确認和(hé)驗證的(de)标準和(hé)指南(nán)性文件，在實驗室的(de)實際檢測工作中，經常遇到現行的(de)檢測标準無法與快(kuài)速發展的(de)檢測手段相适應的(de)情況。爲了(le)提供更準确、高(gāo)效率的(de)檢測服務，實驗室往往需要采用(yòng)自己制定或改進的(de)檢測方法，特别在化(huà)學分(fēn)析領域，越來(lái)越多(duō)的(de)實驗室使用(yòng)标準以外的(de)檢測方法，但如何确保這(zhè)些檢測方法的(de)适宜性和(hé)可(kě)靠性，一直存在争議(yì)。爲此，我國出台了(le)該标準，是實驗室對(duì)化(huà)學分(fēn)析方法進行确認和(hé)方法驗證的(de)指南(nán)性文件，旨在提高(gāo)實驗室化(huà)學分(fēn)析方法和(hé)檢測數據的(de)質量，确保化(huà)學分(fēn)析實驗室所提供數據的(de)有效性、公正性和(hé)可(kě)靠性。
小編對(duì)該規範進行了(le)初步總結，以幫助大(dà)家快(kuài)速閱讀和(hé)了(le)解該《化(huà)學分(fēn)析方法确認和(hé)驗證指南(nán)》，以下(xià)是該标準的(de)精簡介紹和(hé)分(fēn)析。
該國标共有6個(gè)章(zhāng)節，分(fēn)别是範圍、引用(yòng)文件、定義、方法确認要求、方法特性參數的(de)确認、方法驗證要求。另外，該國标還(hái)有3個(gè)附錄，分(fēn)别是方法回收率偏差範圍、實驗室内變異系數、重複性和(hé)再現性自由度對(duì)照(zhào)表。
1 範圍
本标準給出了(le)實驗室對(duì)化(huà)學分(fēn)析方法确認和(hé)方法驗證的(de)一般性原則，并指出适用(yòng)于實驗室對(duì)非标準方法、實驗室制定的(de)方法、超出預定範圍使用(yòng)的(de)标準方法以及實驗室對(duì)新引入的(de)分(fēn)析方法在正式使用(yòng)前的(de)方法驗證。
2 規範性引用(yòng)文件
參考了(le)ISO/IEC 指南(nán)99:2007國際計量學詞彙-基本和(hé)通(tōng)用(yòng)概念及相關術語等文件。
3 術語和(hé)定義
本部分(fēn)對(duì)常見的(de)術語進行了(le)定義，包括：方法确認、方法驗證、實驗室内方法确認、實驗室間方法确認、定性方法、定量方法、确證方法、篩選方法、容許限、檢出限、定量限、精密度、靈敏度、測量區(qū)間、自由度、準确度等。
需要注意的(de)是，該部分(fēn)中“方法确認”對(duì)應的(de)英文是“method validation”，而“方法驗證”對(duì)應的(de)英文是“method verification”，大(dà)家在閱讀時(shí)還(hái)應注意這(zhè)些和(hé)行業内的(de)常見定義是否有區(qū)别。
4 方法确認要求
4.1 總則
實驗室應對(duì)非标準方法、實驗室制定方法、超出其預定範圍使用(yòng)的(de)标準方法、擴充和(hé)修改過的(de)标準方法的(de)确認制定程序。對(duì)于确認過的(de)方法，實驗室應制定作業指導書(shū)。
4.2 确認方法的(de)特定參數
實驗室可(kě)在綜合考慮成本、風險和(hé)技術可(kě)行性基礎上，并根據預期的(de)用(yòng)途來(lái)進行方法确認。實驗室進行方法确認的(de)内容應完整，包括但不限于以下(xià)方法特性：
a)方法的(de)選擇性;
b)方法适用(yòng)範圍;
c)檢出限和(hé)/或定量限;
d)測量範圍和(hé)/或線性範圍;
e)精密度(重複性和(hé)/或再現性);
f)穩健度;
g)正确度;
h)準确度;(注：測量結果的(de)準确度由正确度和(hé)精密度兩個(gè)指标進行表征。)
i)靈敏度;
j)結果的(de)測量不确定度。
4.3 确認方法特性參數的(de)選擇
4.3.1 方法确認的(de)典型特性參數
方法确認首先應明(míng)确檢測對(duì)象特定的(de)需求，包括樣品的(de)特性、數量等，并應滿足客戶的(de)特殊需要，同時(shí)應根據方法的(de)預定用(yòng)途，選擇需要确認的(de)方法特征參數。
典型方法确認參數的(de)選擇，參見表1：
4.3.2 實驗室内方法确認
通(tōng)常情況下(xià)，需要确認的(de)技術參數包括方法的(de)選擇性、檢出限、定量限、線性範圍、正确度、精密度和(hé)穩健度等。
4.3.3 實驗室間方法确認
通(tōng)常情況下(xià)，對(duì)于定性方法，至少應确認方法的(de)檢出限和(hé)選擇性;對(duì)于定量方法，至少應确認方法的(de)适用(yòng)對(duì)象、線性範圍、定量限和(hé)精密度。
5 方法特性參數的(de)确認
5.1 選擇性
分(fēn)析方法應具有一定的(de)選擇性。
5.2 測量範圍
方法的(de)測量範圍通(tōng)常應滿足以下(xià)條件：
a)方法的(de)測量範圍應覆蓋方法的(de)最低濃度水(shuǐ)平(定量限)和(hé)關注濃度水(shuǐ)平。
b)至少需要确認方法測量範圍的(de)最低濃度水(shuǐ)平(定量限)、關注濃度水(shuǐ)平和(hé)最高(gāo)濃度水(shuǐ)平的(de)正确度和(hé)精密度，必要時(shí)可(kě)增加确認濃度水(shuǐ)平。
c)若方法的(de)測量範圍呈線性，還(hái)應滿足5.3條款的(de)要求。
5.3 線性範圍
線性範圍應盡量滿足如下(xià)标準：
a)采用(yòng)校準曲線法定量，并至少具有6個(gè)校準點(包括空白)，濃度範圍盡可(kě)能覆蓋一個(gè)或多(duō)個(gè)數量級，每個(gè)校準點至少随機順序重複測量2次，最好是3次或更多(duō);對(duì)于篩選方法，線性回歸方程的(de)相關系數不低于0.98;對(duì)于準确定量的(de)方法，線性回歸方程的(de)相關系數不低于0.99。
b)校準用(yòng)的(de)标準點應盡可(kě)能均勻地分(fēn)布在關注的(de)濃度範圍并能覆蓋該範圍......
c)濃度範圍一般應覆蓋關注濃度的(de)50%~150%，如需做(zuò)空白時(shí)，則應覆蓋關注濃度的(de)0%~150%。
d)應充分(fēn)考慮可(kě)能的(de)基質效應影(yǐng)響，排除其對(duì)校準曲線的(de)幹擾。
5.4 檢出限和(hé)定量限
5.4.1 需要評估檢出限(LOD)和(hé)定量限(LOQ)的(de)情況
通(tōng)常情況下(xià)，隻有當目标分(fēn)析物(wù)的(de)含量接近于“零”的(de)情況下(xià)或者檢測濃度接近檢出限和(hé)定量限時(shí)，才需要确定方法的(de)LOD或LOQ。
5.4.2 檢出限(LOD)
對(duì)于多(duō)數現代分(fēn)析方法來(lái)說，LOD可(kě)分(fēn)爲兩個(gè)部分(fēn)，即儀器檢出限(IDL)和(hé)分(fēn)析方法檢出限(MDL)。應注意兩者的(de)區(qū)别，在該國标中指出：使用(yòng)信噪比可(kě)用(yòng)來(lái)考察儀器性能，但不适用(yòng)于評估方法的(de)檢出限。
确定檢出限的(de)方法：
在該國标中提到了(le)多(duō)種确定檢出限的(de)方法，包括：
a)目視評價法評估LOD
目視評價法是通(tōng)過在樣品空白中添加已知濃度的(de)分(fēn)析物(wù)，然後确定能夠可(kě)靠檢測出分(fēn)析物(wù)最低濃度值的(de)方法。即在樣品空白中加入一系列不同濃度的(de)分(fēn)析物(wù)，随機對(duì)每一個(gè)濃度點進行約7次獨立測試，通(tōng)過繪制陽性(或陰性)結果百分(fēn)比與濃度相對(duì)應的(de)反應曲線确定阈值濃度。該方法也(yě)可(kě)用(yòng)于定性方法中檢出限的(de)确定。
b)空白标準偏差法評估LOD
即通(tōng)過分(fēn)析大(dà)量的(de)樣品空白或加入最低可(kě)接受濃度的(de)樣品空白來(lái)确定LOD。獨立測試的(de)次數應不少于10次(n≥10)，計算(suàn)出檢測結果的(de)标準偏差，具體的(de)計算(suàn)方法可(kě)參考該國标。
5.4.3 定量限(LOQ)
與檢出限相類似，定量限也(yě)分(fēn)爲儀器定量限和(hé)分(fēn)析方法定量限。
5.5 正确度
測量結果的(de)正确度用(yòng)于表述無窮多(duō)次重複性測定結果的(de)平均值與參考值之間的(de)接近程度，測量結果的(de)偏倚則通(tōng)過回收率實驗進行評估。
5.6 精密度
該國标中對(duì)精密度的(de)描述分(fēn)别從重複性、再現性兩個(gè)維度進行描述。
5.7 穩健度
穩健度可(kě)通(tōng)過由實驗室引入預先設計好的(de)微小的(de)合理(lǐ)變化(huà)因素，并分(fēn)析其影(yǐng)響而得(de)出。可(kě)對(duì)樣品進行預處理(lǐ)、淨化(huà)、分(fēn)析等可(kě)能影(yǐng)響檢測結果的(de)方面進行預實驗，并分(fēn)析可(kě)能影(yǐng)響結果的(de)因素，必要時(shí)進行正交試驗設計進行穩健度試驗。
5.8 測量不确定度
該國标中列舉了(le)可(kě)能影(yǐng)響不确定度的(de)多(duō)方面因素，并對(duì)測量不确定度評估時(shí)的(de)考慮要點進行了(le)介紹。
6 方法驗證要求
對(duì)分(fēn)析方法的(de)驗證提出總體要求，包括定量分(fēn)析和(hé)定性分(fēn)析。在驗證總則中提到，當化(huà)學分(fēn)析實驗室引入标準方法時(shí)，實驗室應根據該國标的(de)相應要求進行驗證，即證實該方法能在該實驗室現有的(de)設施設備、人(rén)員(yuán)、環境等條件下(xià)獲得(de)令人(rén)滿意的(de)結果。
說明(míng)：本文僅是對(duì)國标《合格評定 分(fēn)析方法确認和(hé)驗證指南(nán)》GB/T 27417-2017 的(de)部分(fēn)節選和(hé)介紹，僅供參考，若需獲得(de)更多(duō)準确内容還(hái)請查看國标原文。